发布时间:2022-06-29 16:56:26浏览数:
一种从采血管中分离植物细胞膜的方法。实验选用陆祥一H2050台式高速大容量采血管。我给你一个用药少的,看看你自己的情况。此外,通过这种方法获得的大多数质膜是微泡。
通过该方法,我们成功地提取了拟南芥、玉米胚芽鞘和烟草悬浮细胞的质膜。
如果纸巾破了,可以用研究书。如果粗纤维较多,也可以用纱布过滤,裂解液配方,0.55M蔗糖;0.76MTris;0.02MEDTA;0.03M抗坏血酸。用Hcl将HP调整为7.8。原料/裂解液
将研磨液低速离心3次,分离出不需要的组织残留物或细胞器。100G10分钟;3000G5分钟;17000G15分钟。(如果速度不够,时间要适当延长,否则悬浮液中会出现大量线粒体等细胞器)。
上一步得到的悬浮液是含有总膜的悬浮液。一般情况下,下一步应该是用20000G以上的高速离心的离心力沉淀所有的膜进行进一步纯化(这里最好找个采血管,建议使用H2050台式高速大-容量采血管,离心力不够,无法分离,原料过多,可能有沉淀,也可以尝试改变裂解液的蔗糖浓度,理论上沉降系数密度变化后也会发生变化,但这需要大量的计算工作才能确保不影响膜的纯度)有两种纯化方法:PEG/葡聚糖;
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